(Luận văn thạc sĩ) nghiên cứu tạo dòng và biểu hiện gene kháng nguyên độc tố bền nhiệt STb của e coli trong tế bào vi khuẩn e coli BL21 (DE3) và tối ưu các điều kiện biểu hiện
➤ Gửi thông báo lỗi ⚠️ Báo cáo tài liệu vi phạmNội dung chi tiết: (Luận văn thạc sĩ) nghiên cứu tạo dòng và biểu hiện gene kháng nguyên độc tố bền nhiệt STb của e coli trong tế bào vi khuẩn e coli BL21 (DE3) và tối ưu các điều kiện biểu hiện
(Luận văn thạc sĩ) nghiên cứu tạo dòng và biểu hiện gene kháng nguyên độc tố bền nhiệt STb của e coli trong tế bào vi khuẩn e coli BL21 (DE3) và tối ưu các điều kiện biểu hiện
ILỮ1 CAM ĐOANTôi xin cam đoan: Các số liệu và kết quà nghiên cứu trong luận van này là trung thực và chưa (ifng được ai công bố (rong bất kỳ công trin (Luận văn thạc sĩ) nghiên cứu tạo dòng và biểu hiện gene kháng nguyên độc tố bền nhiệt STb của e coli trong tế bào vi khuẩn e coli BL21 (DE3) và tối ưu các điều kiện biểu hiện nh nào khác. Các (hông tin (rích dán (rong luận vãn đêu đưực chi rò nguồn gốc.Thành Phố Huế, ihúng 6 nam 201 ốTác giả luận vănỉ.ê Minh TuâniiLỜI CẢM ƠNTôi xin chân ihành cảm ơn Trường Dụi Học Nông Lủm Huế, Phòng đào lạo sau đại học, Khoa Chăn nuôi thú y cùng các thầy cô giáo dà nhiệt tình giáng dạy, (Luận văn thạc sĩ) nghiên cứu tạo dòng và biểu hiện gene kháng nguyên độc tố bền nhiệt STb của e coli trong tế bào vi khuẩn e coli BL21 (DE3) và tối ưu các điều kiện biểu hiện truyền đạt kiên thức khoa học kỳ thuật cho lớp cao học khóa 20A chuyên ngành thú y lại trường Dại học Nông Lâm Hue.Lôi xin chân ihành càm ơn đặc hiệt(Luận văn thạc sĩ) nghiên cứu tạo dòng và biểu hiện gene kháng nguyên độc tố bền nhiệt STb của e coli trong tế bào vi khuẩn e coli BL21 (DE3) và tối ưu các điều kiện biểu hiện
đên PCS. IS. Dinh Thị Bích Lân đà lận lình hướng dần đê tôi hoàn ihành đê tài.Tôi xin cám ơn Chi cục Chăn nuôi và Thú y Thừa Thiên Huế, các cán bộ PhILỮ1 CAM ĐOANTôi xin cam đoan: Các số liệu và kết quà nghiên cứu trong luận van này là trung thực và chưa (ifng được ai công bố (rong bất kỳ công trin (Luận văn thạc sĩ) nghiên cứu tạo dòng và biểu hiện gene kháng nguyên độc tố bền nhiệt STb của e coli trong tế bào vi khuẩn e coli BL21 (DE3) và tối ưu các điều kiện biểu hiện điêu kiện cho lôi trong SUÔI ihời gian thực hiện đê lài này.Đề tài này hoàn thành dược sự hỗ trợ kinh phí từ dề tài cấp Bộ do PGS. TS Đinh Thị Bích Lân làm chú nhiệm (Ma số: B2016- DIII1-25)lôi cùng xin chân thành cám ơn các bạn đông nghiệp gán xa đà giúp đò' và động viên lôi trong SUÔI thời gian th (Luận văn thạc sĩ) nghiên cứu tạo dòng và biểu hiện gene kháng nguyên độc tố bền nhiệt STb của e coli trong tế bào vi khuẩn e coli BL21 (DE3) và tối ưu các điều kiện biểu hiện ực lập.Thành phô Huê, tháng 6 nũm 2016Lê Minh TuânHiTÓM TẤTE. Coli một trong nhừng nhóm vi khuân chính gây ra bệnh tiêu chảy ờ lợn con. Chúng có khả n(Luận văn thạc sĩ) nghiên cứu tạo dòng và biểu hiện gene kháng nguyên độc tố bền nhiệt STb của e coli trong tế bào vi khuẩn e coli BL21 (DE3) và tối ưu các điều kiện biểu hiện
ăng sản sinh ra hai loại độc tỗ đường ruột: độc tõ không bên nhiệt (LT) và độc tố bền nhiệt (ST). Độc lố ST có hai loại là STa và STb. Tuy nhiên CƯ chILỮ1 CAM ĐOANTôi xin cam đoan: Các số liệu và kết quà nghiên cứu trong luận van này là trung thực và chưa (ifng được ai công bố (rong bất kỳ công trin (Luận văn thạc sĩ) nghiên cứu tạo dòng và biểu hiện gene kháng nguyên độc tố bền nhiệt STb của e coli trong tế bào vi khuẩn e coli BL21 (DE3) và tối ưu các điều kiện biểu hiện n dế làm nguyên liệu chê tạo vắc xin, kháng thê, chẽ phâm sinh học dùng trong phòng, trị bệnh tiêu chảy ở lợn con là hẽt sức có ý nghĩa và mang tính cầp thiẽt, giảm thiệt hại kinh tế trong ngành chăn nuôi lợn nói chung và gia súc nói riêng. Trong nghiên cứu này, gene estB mâ hoá cho kháng nguyên STb (Luận văn thạc sĩ) nghiên cứu tạo dòng và biểu hiện gene kháng nguyên độc tố bền nhiệt STb của e coli trong tế bào vi khuẩn e coli BL21 (DE3) và tối ưu các điều kiện biểu hiện đưực phân lập bằng phán ứng PCR, lạo dõng và biếu hiện ihành cõng gene eslB vào hai vector pGEM-T easy và pE T200/D-TOPO và biến nạp vào trong hai tẽ(Luận văn thạc sĩ) nghiên cứu tạo dòng và biểu hiện gene kháng nguyên độc tố bền nhiệt STb của e coli trong tế bào vi khuẩn e coli BL21 (DE3) và tối ưu các điều kiện biểu hiện
bào vật chù E. coli TOPIO và E. coli BĨ.21 (DE3). Tiên đĩa petri, khuẩn lạc xanh trắng xuẩt hiện riêng rè như vậy việc lựa chọn các khuân lạc trắng đILỮ1 CAM ĐOANTôi xin cam đoan: Các số liệu và kết quà nghiên cứu trong luận van này là trung thực và chưa (ifng được ai công bố (rong bất kỳ công trin (Luận văn thạc sĩ) nghiên cứu tạo dòng và biểu hiện gene kháng nguyên độc tố bền nhiệt STb của e coli trong tế bào vi khuẩn e coli BL21 (DE3) và tối ưu các điều kiện biểu hiện lái lố hựp chửa doạn gene eslB. Dó khắng dịnh mộl cách chắc chăn hưn, chúng lôi cần chọn lọc các khuân lạc dương tính (khuâìi lạc màu nắng) đẽ kiêm tra sự hiện diện cùa gene esĩĩì bằng kỳ thuật PC.R với cặp môi đặc hiệu và cặp môi MI 3San phấm gắn dượt ú 0' 4°c qua dêm. Sán phám này sau dó dượt biến (Luận văn thạc sĩ) nghiên cứu tạo dòng và biểu hiện gene kháng nguyên độc tố bền nhiệt STb của e coli trong tế bào vi khuẩn e coli BL21 (DE3) và tối ưu các điều kiện biểu hiện nạp vào tẽ bào khâ biẽn E.coli chủng TOP 10 bằng phương pháp sõc nhiệt Ờ42°c trong 60 giây. Sau khi biến nạp, nhờ sự ưự giúp cúa bộ máy long hựp cúa(Luận văn thạc sĩ) nghiên cứu tạo dòng và biểu hiện gene kháng nguyên độc tố bền nhiệt STb của e coli trong tế bào vi khuẩn e coli BL21 (DE3) và tối ưu các điều kiện biểu hiện
le bào vi khuân, plasmid lái lố hựp dưực lạo ra với số lưựng lờn các bán sao. Dịch le bào dưực dưực nuôi cầy bằng cách dàn đêu trên môi nường Ĩ.B (1% ILỮ1 CAM ĐOANTôi xin cam đoan: Các số liệu và kết quà nghiên cứu trong luận van này là trung thực và chưa (ifng được ai công bố (rong bất kỳ công trin (Luận văn thạc sĩ) nghiên cứu tạo dòng và biểu hiện gene kháng nguyên độc tố bền nhiệt STb của e coli trong tế bào vi khuẩn e coli BL21 (DE3) và tối ưu các điều kiện biểu hiện al. Trong môi trường chọn lọc này, các khuân lạc mang vector tái tô hợp sề có màu trắng trong khi các khuân lạc mang vector pGEM ■ -T Easy không mang gene e.srB sè có màu xanh. Tê bào E. coli Bĩ.21 tái tô hợp sinh trường tót ưên môi trường TB với lý lệ liếp giống 2% (giống dà dưực hoại hóa sau 8 giờ (Luận văn thạc sĩ) nghiên cứu tạo dòng và biểu hiện gene kháng nguyên độc tố bền nhiệt STb của e coli trong tế bào vi khuẩn e coli BL21 (DE3) và tối ưu các điều kiện biểu hiện nuôi), lâc 220 vòng/phút. Gene eslB biếu hiện tốt irong tế bào E. cơli BL21 trên môi trường Y.J, ĨPTG (0,8 mM), thời gian 10 giờ, ờ thời điếm cám ứng(Luận văn thạc sĩ) nghiên cứu tạo dòng và biểu hiện gene kháng nguyên độc tố bền nhiệt STb của e coli trong tế bào vi khuẩn e coli BL21 (DE3) và tối ưu các điều kiện biểu hiện
ODtioo 0,6, nhiệt độ 30-37 c.ivMỤC LỤCLỜI CAM ĐOAN........................................................iLèn CÀM ƠN...............................ILỮ1 CAM ĐOANTôi xin cam đoan: Các số liệu và kết quà nghiên cứu trong luận van này là trung thực và chưa (ifng được ai công bố (rong bất kỳ công trin (Luận văn thạc sĩ) nghiên cứu tạo dòng và biểu hiện gene kháng nguyên độc tố bền nhiệt STb của e coli trong tế bào vi khuẩn e coli BL21 (DE3) và tối ưu các điều kiện biểu hiện ..............ivDANH MỤC VĨẼTTẮT...................................................viDANH MỤC BÀNG.....................................................viiDANH MỤC HÌNH VẼ Đồ THỊ..........................................viiiMỚ ĐẦU..............................................................11TÍNHCÃP (Luận văn thạc sĩ) nghiên cứu tạo dòng và biểu hiện gene kháng nguyên độc tố bền nhiệt STb của e coli trong tế bào vi khuẩn e coli BL21 (DE3) và tối ưu các điều kiện biểu hiện THĨẼT.....................................................12MỤC DÍCĨĨ CỦA DÊ TÀĨ.............................................23Ý NGHÌA khoa học và thự(Luận văn thạc sĩ) nghiên cứu tạo dòng và biểu hiện gene kháng nguyên độc tố bền nhiệt STb của e coli trong tế bào vi khuẩn e coli BL21 (DE3) và tối ưu các điều kiện biểu hiện
c TIẾN....................................33.1.Ỷ nghĩa khoa học...............................................33.2.Ý nghĩa thực tiễn..................ILỮ1 CAM ĐOANTôi xin cam đoan: Các số liệu và kết quà nghiên cứu trong luận van này là trung thực và chưa (ifng được ai công bố (rong bất kỳ công trinILỮ1 CAM ĐOANTôi xin cam đoan: Các số liệu và kết quà nghiên cứu trong luận van này là trung thực và chưa (ifng được ai công bố (rong bất kỳ công trinGọi ngay
Chat zalo
Facebook