TỔNG QUAN VỀ CÁC KĨ THUẬT SINH HỌC PHÂN TỬ ý TƯỞNG ỨNG DỤNG
➤ Gửi thông báo lỗi ⚠️ Báo cáo tài liệu vi phạmNội dung chi tiết: TỔNG QUAN VỀ CÁC KĨ THUẬT SINH HỌC PHÂN TỬ ý TƯỞNG ỨNG DỤNG
TỔNG QUAN VỀ CÁC KĨ THUẬT SINH HỌC PHÂN TỬ ý TƯỞNG ỨNG DỤNG
TRƯỜNG THPT CHUYÊN LÊ HÒNG PHONG.........TÓNG QUAN VỀ CÁC KĨ THUẬTSINH HỌC PHÂN TỬ Ý TƯỞNG ỬNG DỤNGTác già:TRƯƠNG ĐÌNH QUANG ĐẢNG (Lớp 10CSI)Tp.HCM th TỔNG QUAN VỀ CÁC KĨ THUẬT SINH HỌC PHÂN TỬ ý TƯỞNG ỨNG DỤNG háng 11/20211PHẤN 1: CẤC Kĩ THUẬT SINH HỌC PHẤN TỪI.Kĩ thuật PCR1.Khái quátPhan ứng chuỗi trùng họp (PCR) là một kỳ thuật sinh học phân tử được sứ dung đê khuếch đại một hoặc một vài bân sao của một đoạn DNA theo cấp lũy thừa, tạo ra hãng ngàn đen hàng triệu ban sao cua một trình tự DNA nào đóĐược đ TỔNG QUAN VỀ CÁC KĨ THUẬT SINH HỌC PHÂN TỬ ý TƯỞNG ỨNG DỤNG ưa ra bỡi Kan Mullis năm 1985 và Saiki hoàn thiện năm 1988. Phương pháp PCR là một kì thuật phô biến trong việc giai trình tự hệ gene; chuẩn đoán bệnhTỔNG QUAN VỀ CÁC KĨ THUẬT SINH HỌC PHÂN TỬ ý TƯỞNG ỨNG DỤNG
di truyền; nghiên cứu quá trinh phát sinh chúng loại; xác định dấu vân tay DNA trong khoa học pháp y hay để xác định quan hệ huyết thống.Kì thuật PCRTRƯỜNG THPT CHUYÊN LÊ HÒNG PHONG.........TÓNG QUAN VỀ CÁC KĨ THUẬTSINH HỌC PHÂN TỬ Ý TƯỞNG ỬNG DỤNGTác già:TRƯƠNG ĐÌNH QUANG ĐẢNG (Lớp 10CSI)Tp.HCM th TỔNG QUAN VỀ CÁC KĨ THUẬT SINH HỌC PHÂN TỬ ý TƯỞNG ỨNG DỤNG ự giống với các trinh tự bò sung VỚI DNA đích và DNA polymerase Là nhừng thành phan quan trọng cho phép khuếch đại một cách chọn lọc và lặp lại. Khi quá trinh PCR diễn ra. DNA mới được tạo ra từ DNA khuôn ban đầu sè tiếp tuc được sư dung làm khuôn đê tồng hợp phân tứ DNA tiếp theo, tạo thảnh chuỗi p TỔNG QUAN VỀ CÁC KĨ THUẬT SINH HỌC PHÂN TỬ ý TƯỞNG ỨNG DỤNG hàn irng dây chuyền trong đó các mầu DNA được khuếch đai theo cấp số nhânHầu như tất cá các kỹ thuật PCR sử dụng một DNA polymerase bền nhiệt, như TaqTỔNG QUAN VỀ CÁC KĨ THUẬT SINH HỌC PHÂN TỬ ý TƯỞNG ỨNG DỤNG
polymerase (enzyme có nguồn gốc tir vi khuẩn Thermits aquaticusỴ DNA polymerase này có hoạt tinh lấp ráp tỏng hợp sợi DNA mới từ các đơn phân nucleotTRƯỜNG THPT CHUYÊN LÊ HÒNG PHONG.........TÓNG QUAN VỀ CÁC KĨ THUẬTSINH HỌC PHÂN TỬ Ý TƯỞNG ỬNG DỤNGTác già:TRƯƠNG ĐÌNH QUANG ĐẢNG (Lớp 10CSI)Tp.HCM th TỔNG QUAN VỀ CÁC KĨ THUẬT SINH HỌC PHÂN TỬ ý TƯỞNG ỨNG DỤNG rình tòng hợp DNA. Phần lớn các phương pháp PCR sứ dụng chu trinh nhiệt, nghĩa Là tiến hãnh xen kè quá trình gia nhiệt và giâm nhiệt các mẫu PCR thông qua một chuồi các giai đoạn nhiệt khác nhau được xác định.Ở bước đầu tiên, hai sợi xoăn kép của DNA được tách ra ở nhiệt độ cao. quá trình được gọi l TỔNG QUAN VỀ CÁC KĨ THUẬT SINH HỌC PHÂN TỬ ý TƯỞNG ỨNG DỤNG à quá trình biến tinh DNA. o bước thứ hai. nhiệt độ được hạ xuống và hai SỢI DNA trờ thành khuôn cho DNA polymerase tòng họp đoạn DNA đích. Khá năng kTỔNG QUAN VỀ CÁC KĨ THUẬT SINH HỌC PHÂN TỬ ý TƯỞNG ỨNG DỤNG
huếch đại chọn lọc là do việc sư dụng mồi mang trình tự bô sung VỚI đoạn DNA đích khuếch đại dưới nhùng chu trinh nhiệt đặc hiệu.2.Thành phần tham giaTRƯỜNG THPT CHUYÊN LÊ HÒNG PHONG.........TÓNG QUAN VỀ CÁC KĨ THUẬTSINH HỌC PHÂN TỬ Ý TƯỞNG ỬNG DỤNGTác già:TRƯƠNG ĐÌNH QUANG ĐẢNG (Lớp 10CSI)Tp.HCM th TỔNG QUAN VỀ CÁC KĨ THUẬT SINH HỌC PHÂN TỬ ý TƯỞNG ỨNG DỤNG i chục Kb. có nhiệm vu định VỊ điếm bắt đầu và điềm kết thục của đoạn DNA mầu.2c)DNA polymerase: là enzyme có nhiệm vụ lông hc.yp các đoạn DNA mới là bân sao cùa trinh tự DNA ban dầu. Enzyme này có khá năng chịu nhiệt cao vã thường sư dụng trong PCR là Taq polymerase.d)Nucleotides (deoxynucleoside t TỔNG QUAN VỀ CÁC KĨ THUẬT SINH HỌC PHÂN TỬ ý TƯỞNG ỨNG DỤNG riphosphates: dNTPs): bao gồm 4 loại (A. T. G. C) -> là các thành phần cơ hãn. được xem như nhưng “viên gạch" câu lạo nên cầu trúc cứa A1)N -> DNA polTỔNG QUAN VỀ CÁC KĨ THUẬT SINH HỌC PHÂN TỬ ý TƯỞNG ỨNG DỤNG
ymerase sir dụng các dNTPs dê tông hợp nên các trinh ĨỊT ADN ban sao.e)Dung dịch đệm (buíTcr solution): cung câp mồi trường hoạt động cho enzyme DNA pTRƯỜNG THPT CHUYÊN LÊ HÒNG PHONG.........TÓNG QUAN VỀ CÁC KĨ THUẬTSINH HỌC PHÂN TỬ Ý TƯỞNG ỬNG DỤNGTác già:TRƯƠNG ĐÌNH QUANG ĐẢNG (Lớp 10CSI)Tp.HCM th TỔNG QUAN VỀ CÁC KĨ THUẬT SINH HỌC PHÂN TỬ ý TƯỞNG ỨNG DỤNG rmal cycler).PCR ComponentsOSA Sjmplr Prmrrs NiKleondeithrrm/il CyderPCR Process (One Cyde)ỉỉììih 1. Khái quát về kĩ thuật PCR.('ó 6 thành phân tham gia vào phán ứng PCR. Irong quá trình PCR, có 3 giai đoạn gia nhiệt: Giai đoạn 1: Tăng nhiệt độ lên 95°C: Giai đoạn 2: Giảm nhiệt dộ xuồng còn khoáng 5 TỔNG QUAN VỀ CÁC KĨ THUẬT SINH HỌC PHÂN TỬ ý TƯỞNG ỨNG DỤNG 5“C; Giai đoạn 3: l àng nhiệt độ lên 72°c.X Quy trìnhNguyên lý hoạt dộng cùa PCR lả dũng enzyme trùng họp polymerase dế nhanh chóng tạo ra một lượng lTỔNG QUAN VỀ CÁC KĨ THUẬT SINH HỌC PHÂN TỬ ý TƯỞNG ỨNG DỤNG
ớn các bán sao lừ một đoạn DNA (RNA) chọn lọc.Thòng thường. PCR bao gồm một chuồi khoảng 20-40 lần biến dối nhiệt dộ lặp di Lặp lại, gọi chu kỳ, moi cTRƯỜNG THPT CHUYÊN LÊ HÒNG PHONG.........TÓNG QUAN VỀ CÁC KĨ THUẬTSINH HỌC PHÂN TỬ Ý TƯỞNG ỬNG DỤNGTác già:TRƯƠNG ĐÌNH QUANG ĐẢNG (Lớp 10CSI)Tp.HCM th TỔNG QUAN VỀ CÁC KĨ THUẬT SINH HỌC PHÂN TỬ ý TƯỞNG ỨNG DỤNG nhiệt dộ cao (>90°C), và sè dừng lại khi sàn phàm cuối cùng được lông hợp hoặc dùng lại ớ nhiệt độ thấp dể lưu trừ sàn phàm PCR trong thời ngắn. Nhiệt độ và thời gian thực hiện cua mỗi chu 3kỳ phụ thuộc vào nhiều yếu (ố. Những yếu lố này gồm enzyme tông họp DNA. nồng độ ion hóa tri hai. dNTPs dùng t TỔNG QUAN VỀ CÁC KĨ THUẬT SINH HỌC PHÂN TỬ ý TƯỞNG ỨNG DỤNG rong phan ứng, và nhiệt độ nóng chay (Tm) cua mồi.Phân ứng PCR gồm nhiều chu kỳ lăp lại nối tiếp nhau. Mỏi chu kỳ gồm 6 bước như sau:TRƯỜNG THPT CHUYÊN LÊ HÒNG PHONG.........TÓNG QUAN VỀ CÁC KĨ THUẬTSINH HỌC PHÂN TỬ Ý TƯỞNG ỬNG DỤNGTác già:TRƯƠNG ĐÌNH QUANG ĐẢNG (Lớp 10CSI)Tp.HCM thTRƯỜNG THPT CHUYÊN LÊ HÒNG PHONG.........TÓNG QUAN VỀ CÁC KĨ THUẬTSINH HỌC PHÂN TỬ Ý TƯỞNG ỬNG DỤNGTác già:TRƯƠNG ĐÌNH QUANG ĐẢNG (Lớp 10CSI)Tp.HCM thGọi ngay
Chat zalo
Facebook