Luận văn nghiên cứu xây dựng quy trình phát hiện nhanh virus cúm gia cầm a h5n1 trong mẫu bệnh phẩm bằng kỹ thuật multiplex reverse transcription polymerase chain reaction
➤ Gửi thông báo lỗi ⚠️ Báo cáo tài liệu vi phạmNội dung chi tiết: Luận văn nghiên cứu xây dựng quy trình phát hiện nhanh virus cúm gia cầm a h5n1 trong mẫu bệnh phẩm bằng kỹ thuật multiplex reverse transcription polymerase chain reaction
Luận văn nghiên cứu xây dựng quy trình phát hiện nhanh virus cúm gia cầm a h5n1 trong mẫu bệnh phẩm bằng kỹ thuật multiplex reverse transcription polymerase chain reaction
MỜ ĐÀUTrong nhùng năm gần đây. dịch cúm gia cầm do virus A/H5N1 là vấn để quan (âm đối với cá thế giới, đặc biệt là đối với các nước châu Á như Việt N Luận văn nghiên cứu xây dựng quy trình phát hiện nhanh virus cúm gia cầm a h5n1 trong mẫu bệnh phẩm bằng kỹ thuật multiplex reverse transcription polymerase chain reaction Nam. Indonesia, Thái Lan. Trung Quốc... Kê từ cuối năm 2003 đến nay, dịch cúm A/H5N1 đã gây thiệt hại rất lớn cho ngành chăn nuôi gia cầm và gây tữ vong cho hàng trăm người. Cà thế giới đang lo sợ trước nguy cơ có thế xảy ra một đại dịch cúm trên người do virus A H5N1 giống như các vụ đại dịch cúm đ Luận văn nghiên cứu xây dựng quy trình phát hiện nhanh virus cúm gia cầm a h5n1 trong mẫu bệnh phẩm bằng kỹ thuật multiplex reverse transcription polymerase chain reaction ã xảy ra trong thế kỷ 20. Các nước trên thế giới đà tiêu tốn hàng tỷ đô la cho việc chuần bị chống lại một đại dịch cúm H5N1 có thẻ xảy ra trong tươngLuận văn nghiên cứu xây dựng quy trình phát hiện nhanh virus cúm gia cầm a h5n1 trong mẫu bệnh phẩm bằng kỹ thuật multiplex reverse transcription polymerase chain reaction
lai như mua thuốc và các thiết bị y tế, nghiên cứu sàn xuất vaccine, thực hành các phương án phòng chống dịch, thực hiện các chiến lược nhảm kiềm soáMỜ ĐÀUTrong nhùng năm gần đây. dịch cúm gia cầm do virus A/H5N1 là vấn để quan (âm đối với cá thế giới, đặc biệt là đối với các nước châu Á như Việt N Luận văn nghiên cứu xây dựng quy trình phát hiện nhanh virus cúm gia cầm a h5n1 trong mẫu bệnh phẩm bằng kỹ thuật multiplex reverse transcription polymerase chain reaction hàng triệu gia cầm bị chết và tiêu hủy. Theo thống kẽ của Tồ chức Y tế Thế giới, Việt Nam đang đứng thứ 2 trên thế giới (sau Indonesia) về số người nhiễm và tư vong do virus A H5N1.Virus cúm A/H5N1 là virus có khá năng biến đổi gen nhanh chóng và hình thành nên các chúng virus mới nên việc sử dụng v Luận văn nghiên cứu xây dựng quy trình phát hiện nhanh virus cúm gia cầm a h5n1 trong mẫu bệnh phẩm bằng kỹ thuật multiplex reverse transcription polymerase chain reaction accine đế dự phòng thường không đạt được hiệu qua cao. Ỏ Việt Nam hiện nay, dịch cúm A 'H5N1 vần liên tục xáy ra trên gia cầm và người, mặc dủ mức độLuận văn nghiên cứu xây dựng quy trình phát hiện nhanh virus cúm gia cầm a h5n1 trong mẫu bệnh phẩm bằng kỹ thuật multiplex reverse transcription polymerase chain reaction
không trầm trọng như giai đoạn trước đây nhưng nếu không được phát hiện và có các biện pháp dập dịch kịp thời thì dịch có thế trớ nên bùng phát.Khi cóMỜ ĐÀUTrong nhùng năm gần đây. dịch cúm gia cầm do virus A/H5N1 là vấn để quan (âm đối với cá thế giới, đặc biệt là đối với các nước châu Á như Việt N Luận văn nghiên cứu xây dựng quy trình phát hiện nhanh virus cúm gia cầm a h5n1 trong mẫu bệnh phẩm bằng kỹ thuật multiplex reverse transcription polymerase chain reaction ng ra cộng đồng. Để phát hiện virus cúm A H5N1 trong các mầu bệnh phầm ờ người và gia cầm. hiện nay hầu hết các phòng xét nghiệm đểu áp dụng kỳ thuật RT-PCR (Reverse Transcription - Polymerase Chain Reaction). Đầy là kỳ thuật sinh học phân tứ. cho phép phát hiện virus với độ chính xác cao, thời gian Luận văn nghiên cứu xây dựng quy trình phát hiện nhanh virus cúm gia cầm a h5n1 trong mẫu bệnh phẩm bằng kỹ thuật multiplex reverse transcription polymerase chain reaction làm xét nghiêm khoáng 4-6 giờ nếu thực hiện Realtime RT-PCR và 12-24 giờ nếu thực hiện RT-1PCR và điện di irèn gel agarose. Với RT-PCR thông thường,Luận văn nghiên cứu xây dựng quy trình phát hiện nhanh virus cúm gia cầm a h5n1 trong mẫu bệnh phẩm bằng kỹ thuật multiplex reverse transcription polymerase chain reaction
người la phai thực hiện ba phân ứng dê chân đoán xác định virus cúm A.ĨĨ5N1, bao gồm: một phân ứng đê xác định virus cúm A. một phan ứng xác định subtMỜ ĐÀUTrong nhùng năm gần đây. dịch cúm gia cầm do virus A/H5N1 là vấn để quan (âm đối với cá thế giới, đặc biệt là đối với các nước châu Á như Việt N Luận văn nghiên cứu xây dựng quy trình phát hiện nhanh virus cúm gia cầm a h5n1 trong mẫu bệnh phẩm bằng kỹ thuật multiplex reverse transcription polymerase chain reaction ứng dụng kỳ thuật multiplex RT-PCR, cho phép chẩn doán xác dịnh cúm A/ĨĨ5N1 chi với một phán ứng RT-PCR thay vì phai làm ba phan ứng RT-PCR. Tuy nhiên, việc nghiên cứu ihiếl ke và xây dựng quỵ trinh thục hiện kỳ thuật multiplex RT-PCR khá phức tạp nên hiện nay hầu hết các phòng xél nghiệm trong nước Luận văn nghiên cứu xây dựng quy trình phát hiện nhanh virus cúm gia cầm a h5n1 trong mẫu bệnh phẩm bằng kỹ thuật multiplex reverse transcription polymerase chain reaction chưa áp dụng kỳ thuật này trong chẩn đoán cúm A/IĨ5N1. Chinh vi vậy, chúng tỏi thực hiện '"Nghiên cún xây dựng quy trình phứt hiện nhanh virus cúm giLuận văn nghiên cứu xây dựng quy trình phát hiện nhanh virus cúm gia cầm a h5n1 trong mẫu bệnh phẩm bằng kỹ thuật multiplex reverse transcription polymerase chain reaction
a cầm A/H5N1 trong mẫu bệnh phầm bằng kỹ thuật Multiplex Reverse Transcription Polymerase Chain Reaction" tại Labo Trường Dại học Y Thái Bình với mục MỜ ĐÀUTrong nhùng năm gần đây. dịch cúm gia cầm do virus A/H5N1 là vấn để quan (âm đối với cá thế giới, đặc biệt là đối với các nước châu Á như Việt N Luận văn nghiên cứu xây dựng quy trình phát hiện nhanh virus cúm gia cầm a h5n1 trong mẫu bệnh phẩm bằng kỹ thuật multiplex reverse transcription polymerase chain reaction iều kiện của phân ứng multiplex RT-PCR: nhiệt độ vả thời gian gắn mồi, nồng độ mồi,...3.Thư nghiệm được phân ứng multiplex RT-PCR phái hiện A/H5N1 trên một số mầu bệnh phàm thu thập tir người và gia cẩm.2Chương 1. TỎNG QUAN1.1.DẠI CƯƠNG VỀ VIRUS CÚMA/H5N11.1.1.Phán loại học và danh pháp1.1.1.1.Phân Luận văn nghiên cứu xây dựng quy trình phát hiện nhanh virus cúm gia cầm a h5n1 trong mẫu bệnh phẩm bằng kỹ thuật multiplex reverse transcription polymerase chain reaction loại virus cúmTheo ủy ban Quốc tế về phân loại virus (ICTV - International Committee on Taxonomy of Viruses), virus cúm thuộc nhỏm V, họ OrthormyxơvirLuận văn nghiên cứu xây dựng quy trình phát hiện nhanh virus cúm gia cầm a h5n1 trong mẫu bệnh phẩm bằng kỹ thuật multiplex reverse transcription polymerase chain reaction
idae, gồm 3 type lã A. B vã c. Chúng là các virus có vật liệu di truyền là RNA sợi đơn âm [32].Sự phàn biệt virus cúm A. B và c dựa trên sự khác nhau MỜ ĐÀUTrong nhùng năm gần đây. dịch cúm gia cầm do virus A/H5N1 là vấn để quan (âm đối với cá thế giới, đặc biệt là đối với các nước châu Á như Việt N Luận văn nghiên cứu xây dựng quy trình phát hiện nhanh virus cúm gia cầm a h5n1 trong mẫu bệnh phẩm bằng kỹ thuật multiplex reverse transcription polymerase chain reaction cúm c chi có 7 đoạn RNA [36].Trong 3 type thi type A là virus có giới hạn vật chú rất rộng, lưu hành phổ biến trên gia cầm và một số động vật có vủ như lợn, ngựa, chó. mèo, hài cầu,... và cà con người [32]. Virus cúm A là loại có độc lực mạnh nhất, có khả năng biến đói gen rất lớn và nguyên nhân chu Luận văn nghiên cứu xây dựng quy trình phát hiện nhanh virus cúm gia cầm a h5n1 trong mẫu bệnh phẩm bằng kỹ thuật multiplex reverse transcription polymerase chain reaction yếu gày ra các vụ đại dịch cúm trong thế kỷ qua. Dựa vào sự khác biệt về đặc tính kháng nguyên của hai glycoprotein là haemagglutinin (HA) và neuramiLuận văn nghiên cứu xây dựng quy trình phát hiện nhanh virus cúm gia cầm a h5n1 trong mẫu bệnh phẩm bằng kỹ thuật multiplex reverse transcription polymerase chain reaction
nidase (NA), virus cúm A cỏn được chia thành 16 subtype HA (H1-H16) và 9 subtype NA (N1-N9). Sự tái tố hợp giừa các subtype HA và NA, về mặt lý thuyếtMỜ ĐÀUTrong nhùng năm gần đây. dịch cúm gia cầm do virus A/H5N1 là vấn để quan (âm đối với cá thế giới, đặc biệt là đối với các nước châu Á như Việt N Luận văn nghiên cứu xây dựng quy trình phát hiện nhanh virus cúm gia cầm a h5n1 trong mẫu bệnh phẩm bằng kỹ thuật multiplex reverse transcription polymerase chain reaction loài thúy cầm hoang dà. Tuy nhiên, chi có một số subtype nhất định thường xuyên lưu hành trên người như H1N1. H1N2, H2N2, H3N2 [11]. Cúm A/H5N1 là một subtype có khả năng gây nhiễm cao của virus cúm. Các chúng cùa virus cúm gia cẩm có thề xâm nhiễm vào nhiều loại động vật khác nhau như chim, lợn, n Luận văn nghiên cứu xây dựng quy trình phát hiện nhanh virus cúm gia cầm a h5n1 trong mẫu bệnh phẩm bằng kỹ thuật multiplex reverse transcription polymerase chain reaction gựa, hãi cầu. cá voi và con người.Virus cúm B và virus cúm c lưu hành chu yếu trên người và chi gây ra các vụ dịch ở mức độ vừa và nhỏ.31.1.1.2.Phân lLuận văn nghiên cứu xây dựng quy trình phát hiện nhanh virus cúm gia cầm a h5n1 trong mẫu bệnh phẩm bằng kỹ thuật multiplex reverse transcription polymerase chain reaction
oại virus cúm A/H5N1Virus cúm A/H5N1 được phân biệt với các subtype virus cúm A khác dựa trên sự khác biệt về dặc tinh kháng nguyên ĨĨA và NA. Do có kMỜ ĐÀUTrong nhùng năm gần đây. dịch cúm gia cầm do virus A/H5N1 là vấn để quan (âm đối với cá thế giới, đặc biệt là đối với các nước châu Á như Việt N Luận văn nghiên cứu xây dựng quy trình phát hiện nhanh virus cúm gia cầm a h5n1 trong mẫu bệnh phẩm bằng kỹ thuật multiplex reverse transcription polymerase chain reaction i clade.'subcladc có các đặc diêm di truyền đặc trưng [2J.Các genotype cùa virus cúm A/TT5N1Trong nhùng năm gằn dày virus cúm A/IĨ5N1 dà cỏ nhừng biến dôi di truyền và được phàn chia thành nhiều nhóm dựa vào sự khác biệt về kiều gen (genotype). Kiêu gcn của virus cúm A/H5N1 thô hiện dặc dicm di truy Luận văn nghiên cứu xây dựng quy trình phát hiện nhanh virus cúm gia cầm a h5n1 trong mẫu bệnh phẩm bằng kỹ thuật multiplex reverse transcription polymerase chain reaction ền cúa virus dược hình thành do sự kết họp cùa 8 phân đoạn gen. Trên CƯ sở gen H5 và NI cua chung gốc Goose/Guangdong/1/96, virus A/H5N1 được phân chiLuận văn nghiên cứu xây dựng quy trình phát hiện nhanh virus cúm gia cầm a h5n1 trong mẫu bệnh phẩm bằng kỹ thuật multiplex reverse transcription polymerase chain reaction
a thảnh các kiều gcn khác nhau với các đặc điềm di truyền được hình thành do sự tái tó hợp 6 gen còn lại từ các nguồn khác nhau. Các kiểu gen khác nhaMỜ ĐÀUTrong nhùng năm gần đây. dịch cúm gia cầm do virus A/H5N1 là vấn để quan (âm đối với cá thế giới, đặc biệt là đối với các nước châu Á như Việt N Luận văn nghiên cứu xây dựng quy trình phát hiện nhanh virus cúm gia cầm a h5n1 trong mẫu bệnh phẩm bằng kỹ thuật multiplex reverse transcription polymerase chain reaction gen (B, z, z+, V, G, W, và Xo) lưu hãnh được trên 2 năm, chửng tô chúng đà thích nghi đè có thè tồn tại [22]. Kiêu gen z là kiêu gen lưu hành phố biến ờ Indonesia, Thãi Lan, Việt Nam và phía nam Trung Quốc từ năm 2003 đen nay [14].Các clade cùa virus cúm A/H5MCác lô chức WHO (World Health Organizati Luận văn nghiên cứu xây dựng quy trình phát hiện nhanh virus cúm gia cầm a h5n1 trong mẫu bệnh phẩm bằng kỹ thuật multiplex reverse transcription polymerase chain reaction on), OIL (Organisation for Animal Health) vã TAO (Food and Agriculture Organization) dà cùng nhau xây dựng một hệ thong danh pháp thống nhai đê có thêLuận văn nghiên cứu xây dựng quy trình phát hiện nhanh virus cúm gia cầm a h5n1 trong mẫu bệnh phẩm bằng kỹ thuật multiplex reverse transcription polymerase chain reaction
xác định các clade A/H5N1 [50J. ĨTiện nay, hộ thống danh pháp nảy chia virus A/TT5NI thành 10 cladc khác nhau, mồi clade còn có thề phân thành các suMỜ ĐÀUTrong nhùng năm gần đây. dịch cúm gia cầm do virus A/H5N1 là vấn để quan (âm đối với cá thế giới, đặc biệt là đối với các nước châu Á như Việt N Luận văn nghiên cứu xây dựng quy trình phát hiện nhanh virus cúm gia cầm a h5n1 trong mẫu bệnh phẩm bằng kỹ thuật multiplex reverse transcription polymerase chain reaction ưu hành và liếp lục hình thành các subclade mới [5j. Kè từ 2008, các cladc A/ĨĨ5N1 hiện dang lưu hành và gây bệnh ô người gồm cỏ4clade 2.3.2 (Trung Quốc), 2.3.4 (Trung Quốc vã Việt Nam) 2.2 (Ai Cập), 2.1 (Indonesia). 1 (Campuchia) và 7 (Trung Quốc) [51].1.1.1.3.Danh pháp virus cúmTô chức Y tế thế gi Luận văn nghiên cứu xây dựng quy trình phát hiện nhanh virus cúm gia cầm a h5n1 trong mẫu bệnh phẩm bằng kỹ thuật multiplex reverse transcription polymerase chain reaction ới (WHO) đà quy định thống nhất danh pháp của virus cúm theo thứ tự ki hiệu: type virus (A, B hoặc C), vật chù (có thế bó qua nếu vật chù là người), đLuận văn nghiên cứu xây dựng quy trình phát hiện nhanh virus cúm gia cầm a h5n1 trong mẫu bệnh phẩm bằng kỹ thuật multiplex reverse transcription polymerase chain reaction
ịa diêm phân lập virus, mã số chung virus và năm phàn lập. Nếu là virus cúm A thì phái thêm ki hiệu của kháng nguyên HA và kháng nguyên NA đặt trong dMỜ ĐÀUTrong nhùng năm gần đây. dịch cúm gia cầm do virus A/H5N1 là vấn để quan (âm đối với cá thế giới, đặc biệt là đối với các nước châu Á như Việt N Luận văn nghiên cứu xây dựng quy trình phát hiện nhanh virus cúm gia cầm a h5n1 trong mẫu bệnh phẩm bằng kỹ thuật multiplex reverse transcription polymerase chain reaction yên HA là H5 và kháng nguyên NA là Nl.A' Chicken Vietnam /GỐ2/2005 (H5N1) lã chủng virus cúm A phân lập ớ gà tại Việt Nam năm 2005, mà số chủng là G62, kháng nguyên HA là H5 và kháng nguyên NA lãNl.1.1.2. Hình thái và cấu trúc virus cúm A/H5N1Virus cúm H5N1 là một subtype của virus cúm A. thuộc họ O Luận văn nghiên cứu xây dựng quy trình phát hiện nhanh virus cúm gia cầm a h5n1 trong mẫu bệnh phẩm bằng kỹ thuật multiplex reverse transcription polymerase chain reaction rthomyxoviridea. Virus cúm A/H5N1 mang các đặc điềm cúa virus cúm A (hình 1.1).MỜ ĐÀUTrong nhùng năm gần đây. dịch cúm gia cầm do virus A/H5N1 là vấn để quan (âm đối với cá thế giới, đặc biệt là đối với các nước châu Á như Việt NGọi ngay
Chat zalo
Facebook