Xác định kiểu gen virus viêm gan c trong huyết thanh bệnh nhân viêm gan c bằng kỹ thuật sinh học phân tử RT PCR
➤ Gửi thông báo lỗi ⚠️ Báo cáo tài liệu vi phạmNội dung chi tiết: Xác định kiểu gen virus viêm gan c trong huyết thanh bệnh nhân viêm gan c bằng kỹ thuật sinh học phân tử RT PCR
Xác định kiểu gen virus viêm gan c trong huyết thanh bệnh nhân viêm gan c bằng kỹ thuật sinh học phân tử RT PCR
Phương Thị HàLuận vân Thục sĩ khoa họcĐẠI HỌC QƯỔC GIA HÀ NỘITRƯỜNG ĐẠI HỌC KHOA HỌC Tự NHIÊN • • • •Phương Thị IlàXÁC ĐỊNH KIỂU GEN VIRUS VIÊM GAN c Xác định kiểu gen virus viêm gan c trong huyết thanh bệnh nhân viêm gan c bằng kỹ thuật sinh học phân tử RT PCR TRONG HUYÉT THANH BỆNH NHÂN VIÊM GAN c BẰNG KỸ THUẬT SINH HỌC PHÂN TỦ RT - PCRChuyên ngành : Vi sinh vặt học Mà số: 60 42 40LUẬN VĂN THẠC sĩ KĨĨOA ĨĨỌCNGƯỜI Hl >ỚNG D.ỈNKHO.í HỌC:Ts.Bs Nguyễn I 'ủn TienHÀ NỘI-20121Phương Thị HàLuận văn Thạc sĩ khoa họcĐẬT VÁN ĐÉBệnh viêm gan do virul c là có ảnh hư Xác định kiểu gen virus viêm gan c trong huyết thanh bệnh nhân viêm gan c bằng kỹ thuật sinh học phân tử RT PCR ớng lớn đen linh trạng sức khóc của con người trên toàn thế giới . bời vì sau khi bị nhiễm virus viêm gan c cấp tính thi có khoáng 70-90% bệnh nhân chXác định kiểu gen virus viêm gan c trong huyết thanh bệnh nhân viêm gan c bằng kỹ thuật sinh học phân tử RT PCR
uyên lừ giai đoạn cấp lính sang giai đoạn mạn lính và có tới 20-25% trong số bệnh nhân này sè chuyển qua giai đoạn xơ gan vã ung thư gan [17.33.36]. TPhương Thị HàLuận vân Thục sĩ khoa họcĐẠI HỌC QƯỔC GIA HÀ NỘITRƯỜNG ĐẠI HỌC KHOA HỌC Tự NHIÊN • • • •Phương Thị IlàXÁC ĐỊNH KIỂU GEN VIRUS VIÊM GAN c Xác định kiểu gen virus viêm gan c trong huyết thanh bệnh nhân viêm gan c bằng kỹ thuật sinh học phân tử RT PCR hi nhận vể lình hình nhiêm virul viêm gan c ờ Việt Nam ihì li lệ người binh thường bị nhiễm căn bệnh này là khoang 6% [42J. xem như là thuộc nhóm các quốc gia có li lệ nhiêm viêm gan c cao trên thế giới [13.42].HCV là một virul có bộ gcn là ARN, trong chu kỳ nhàn đôi cúa virul phái sứ dụng men ARN p Xác định kiểu gen virus viêm gan c trong huyết thanh bệnh nhân viêm gan c bằng kỹ thuật sinh học phân tử RT PCR olymerase, mà men nãy không có kha năng sưa sai trong quá trinh lông herp ARN, lừ đó làm cho bộ gcn cúa virus râl đa dạng nên người la đà phàn virus tXác định kiểu gen virus viêm gan c trong huyết thanh bệnh nhân viêm gan c bằng kỹ thuật sinh học phân tử RT PCR
hành nhiêu loại (type) khác nhau[7,50J và con dường lây nhiễm chu yếu cua HCV là qua đường máu. Sau khi xác định được người dưomg lính vói anli-HCV, BPhương Thị HàLuận vân Thục sĩ khoa họcĐẠI HỌC QƯỔC GIA HÀ NỘITRƯỜNG ĐẠI HỌC KHOA HỌC Tự NHIÊN • • • •Phương Thị IlàXÁC ĐỊNH KIỂU GEN VIRUS VIÊM GAN c Xác định kiểu gen virus viêm gan c trong huyết thanh bệnh nhân viêm gan c bằng kỹ thuật sinh học phân tử RT PCR hiết là định lượng Sổ lượng siêu vi trong mâu (IICV-ARN) và dinh kiêu gen cua siêu vi gây viêm gan c (HCV Genotypes) [1.37]. Kiêu gen HCV phàn bò khác nhau tùy theo vùng địa lý. mồi châu lục hay mồi nước có nhừng kiểu gen nổi trội riêng [41.43J. Hiện nay trên the giới đà bièt được 6 loại genotypes v Xác định kiểu gen virus viêm gan c trong huyết thanh bệnh nhân viêm gan c bằng kỹ thuật sinh học phân tử RT PCR à khoáng hon 50 subtype (dưỡi lypc)[3,7], ờ Việt Nam phố biến genotypes 1.2. vã 6. kiêu genotype 3 hiếm gặp [1.50J.Dê xác đinh được genotypes HCV thiXác định kiểu gen virus viêm gan c trong huyết thanh bệnh nhân viêm gan c bằng kỹ thuật sinh học phân tử RT PCR
ngày nay với sụ phát triền của còng nghệ sinh học. dặc biệt là chuyên ngành công nghệ sinh học phân tử dà phát minh nhiều kỳ thuật đế xác định kiều gePhương Thị HàLuận vân Thục sĩ khoa họcĐẠI HỌC QƯỔC GIA HÀ NỘITRƯỜNG ĐẠI HỌC KHOA HỌC Tự NHIÊN • • • •Phương Thị IlàXÁC ĐỊNH KIỂU GEN VIRUS VIÊM GAN c Xác định kiểu gen virus viêm gan c trong huyết thanh bệnh nhân viêm gan c bằng kỹ thuật sinh học phân tử RT PCR Tuy nhiên, giá thành của nhùng bộ kil này còn cao nên chưa dược áp dụng rộng rài. Ở Việt Nam phổ biến hai kỳ thuật xác định genotypes2Phương Thị HàLuận văn Thạc sĩ khoa họcHCV: Real-time PCR (RT-PCR) và kỳ thuật giãi trinh lự gen (sequencing). Kỳ thuật Sequencing trong chuẩn đoán có nhiều tính ini v Xác định kiểu gen virus viêm gan c trong huyết thanh bệnh nhân viêm gan c bằng kỹ thuật sinh học phân tử RT PCR iệt trong việc xác định kiêu gen là sự chính xác cao. tránh được nhừng nhầm lẫn trên cùng một type hoặc subtype nhưng phương pháp này cẩn có các máy mXác định kiểu gen virus viêm gan c trong huyết thanh bệnh nhân viêm gan c bằng kỹ thuật sinh học phân tử RT PCR
óc trang thiết bị hiện dại và diều kiện kỳ thuật cao nên gia thành cao chú yếu đưực thực hiện lại các trung lâm nghiên cứu. Kỹ thuật RT-PCR được tiến Phương Thị HàLuận vân Thục sĩ khoa họcĐẠI HỌC QƯỔC GIA HÀ NỘITRƯỜNG ĐẠI HỌC KHOA HỌC Tự NHIÊN • • • •Phương Thị IlàXÁC ĐỊNH KIỂU GEN VIRUS VIÊM GAN c Xác định kiểu gen virus viêm gan c trong huyết thanh bệnh nhân viêm gan c bằng kỹ thuật sinh học phân tử RT PCR ế cùa da số người dân ơ Việt Nam.tuy nhiên không xác định được den subtype và có sự nhâm lẩn giừa lypcl và lypeó. Với mục đích khuyên cáo bệnh nhân lựa chọn dũng phương pháp xác định genotype, vi vậy tôi chọn dề tài: “Xác dịnh kiểu gen virus viêm gan c trong huyết thanh bệnh nhân viêm gan c hàng kỹ Xác định kiểu gen virus viêm gan c trong huyết thanh bệnh nhân viêm gan c bằng kỹ thuật sinh học phân tử RT PCR thuật sinh hục phân từ R T-P( 'R'\ vói nhìmg mục liêu như sau :1) Xác dịnh ti ỉệ người mang kiểu gen HCV bằng phương pháp RT-PCR sứ dụng Taqman probe.Xác định kiểu gen virus viêm gan c trong huyết thanh bệnh nhân viêm gan c bằng kỹ thuật sinh học phân tử RT PCR
2) Xác định lại kieu gen type ỉ bang phương pháp giải trinh iựgen (Sequencing) trên đoạn gen NS5B.3Phương Thị HàLuận vân Thạc sỉ khoa họcChưoìig 1: TÓPhương Thị HàLuận vân Thục sĩ khoa họcĐẠI HỌC QƯỔC GIA HÀ NỘITRƯỜNG ĐẠI HỌC KHOA HỌC Tự NHIÊN • • • •Phương Thị IlàXÁC ĐỊNH KIỂU GEN VIRUS VIÊM GAN c Xác định kiểu gen virus viêm gan c trong huyết thanh bệnh nhân viêm gan c bằng kỹ thuật sinh học phân tử RT PCR cùa bộ phận truyền máu Viện Quốc gia Sức khóe Hoa Kỳ chứng minh là nliiềm virut sau truyền máu phần lởn là do virut viêm gan không phái là A và cùng không phải là B và được đặt tên là virut không A-không B.Mười bay năm sau (năm 1987) Michael Houghton. Qui-lim Choo và tập đoàn. Gorge K dung sinh học Xác định kiểu gen virus viêm gan c trong huyết thanh bệnh nhân viêm gan c bằng kỹ thuật sinh học phân tử RT PCR phàn tứ định clon đê đinh tính virus không A không B , nãm 1989 dă xác dịnh viniĩ không A không B cô tên chinh thức là virut viêm gan (’ và được côngXác định kiểu gen virus viêm gan c trong huyết thanh bệnh nhân viêm gan c bằng kỹ thuật sinh học phân tử RT PCR
bò bàng 2 bài trên báo Scicncc[7].Virus viêm gan c ( Hepatitis c virus - HCV) thuộc nhóm IV (+ssARN) virus ARN. IIọ Flaviridae. cùng họ với virus DenPhương Thị HàLuận vân Thục sĩ khoa họcĐẠI HỌC QƯỔC GIA HÀ NỘITRƯỜNG ĐẠI HỌC KHOA HỌC Tự NHIÊN • • • •Phương Thị IlàXÁC ĐỊNH KIỂU GEN VIRUS VIÊM GAN c Xác định kiểu gen virus viêm gan c trong huyết thanh bệnh nhân viêm gan c bằng kỹ thuật sinh học phân tử RT PCR guyên nhàn phô biến nhất gây bệnh vicm gan mạn lính, xa gan và ung thư gan nguyên phát [6.12].1.1.2.Hình thái cấu trúc virut viêm gan cVirut viêm gan c là loại virul hướng gan dưới kính hicn vi điện tử người phát hiện IICV có hình cầu. hình da diện hoặc hình que kích thước nho (Hình 1.1).Hình 1.1 Hĩ Xác định kiểu gen virus viêm gan c trong huyết thanh bệnh nhân viêm gan c bằng kỹ thuật sinh học phân tử RT PCR nh thái cùa HCV dưới kinh hiển vi điện từ4Phương Thị HàLuận vân Thục sĩ khoa họcĐẠI HỌC QƯỔC GIA HÀ NỘITRƯỜNG ĐẠI HỌC KHOA HỌC Tự NHIÊN • • • •Phương Thị IlàXÁC ĐỊNH KIỂU GEN VIRUS VIÊM GAN c Phương Thị HàLuận vân Thục sĩ khoa họcĐẠI HỌC QƯỔC GIA HÀ NỘITRƯỜNG ĐẠI HỌC KHOA HỌC Tự NHIÊN • • • •Phương Thị IlàXÁC ĐỊNH KIỂU GEN VIRUS VIÊM GAN cGọi ngay
Chat zalo
Facebook